? ?傳統(tǒng)層析工藝，由于流穿效應(yīng)，有40-60%的填料是無法被利用的，從而使得載量和處理量大為受限。Capture SMB用于優(yōu)化捕獲環(huán)節(jié)，作為最簡(jiǎn)單和最優(yōu)化的2柱位設(shè)計(jì)，可使純化效率顯著提高，并且使填料用量大為縮減。

? ? ? Capture SMB是將第一根層析柱的抗體/蛋白流穿繼續(xù)上樣至第二根層析柱，待第一根層析柱完全滿載后，方結(jié)束其上樣進(jìn)行淋洗，并繼續(xù)進(jìn)行洗脫、再生、再平衡操作，而此時(shí)第二根層析柱會(huì)獨(dú)立進(jìn)行上樣操作。通過切換柱位操作，保證2根層析柱的洗脫、再生、上樣等操作交替銜接進(jìn)行，從而實(shí)現(xiàn)工藝與系統(tǒng)硬件設(shè)計(jì)的完美結(jié)合，使填料利用率最大化，累積用量大為縮減。

舉例說明

Mabselect SuRe：靜態(tài)載量60 g/L，使用壽命200 cycles；

處理量：600 kg mAb，填料體積：均為100 L。

MCSGP（多柱逆流溶劑梯度純化）

? ? ??MCSGP（Multicolumn Countercurrent Solvent GradientPurification）用于精純環(huán)節(jié)，可有效克服SMB（模擬移動(dòng)床）僅適用于二元分離、無法實(shí)現(xiàn)線性梯度的缺點(diǎn)。

? ? ? ?傳統(tǒng)的層析精純工藝，必須在收率和純度之間做出權(quán)衡，兩者此消彼長(zhǎng)。如何在保證獲得高純度產(chǎn)品的同時(shí)，得到高收率，一直是層析精純工藝所面臨的難點(diǎn)。

? ??? MCSGP工藝，可將含有不純組分的產(chǎn)品回收在一個(gè)封閉的環(huán)內(nèi)，進(jìn)行循環(huán)式的層析操作，從而最大限度地提取純產(chǎn)品，使得收率和純度二者兼得。

應(yīng)用案例

N-Rich

? ??? ?N-Rich工藝是微量物質(zhì)的富集過程，比如將產(chǎn)品的相關(guān)雜質(zhì)選擇性地富集在一個(gè)循環(huán)的層析過程中，待富集至目標(biāo)量，再進(jìn)行洗脫回收。該方法特別適用于分離與產(chǎn)品有關(guān)的雜質(zhì)，如異構(gòu)體和聚集體，并同時(shí)用于發(fā)現(xiàn)研究。

應(yīng)用案例

Discovery技術(shù)簡(jiǎn)介

? ? ? Discovery層析技術(shù)可將多步層析整合為一步，從而縮短純化時(shí)間，提高純化效率。第1步層析的產(chǎn)物無需進(jìn)行收集，通過在線稀釋，可直接上樣至第2根層析柱。即第1步層析的洗脫與第2步層析的上樣同時(shí)進(jìn)行，使純化周期顯著縮短。ContichromDiscovery系統(tǒng)可額外擴(kuò)展出35個(gè)入口，實(shí)現(xiàn)高通量純化。

應(yīng)用案例

? ? ? 第一步Protein A；第二步CIEX；第三步Desalting（分子篩脫鹽換液）。

? ? ? ?在該過程中，Protein A的洗脫組分經(jīng)過在線稀釋，直接上樣至CIEX層析柱，CIEX進(jìn)行線性洗脫，去除降解物及聚集體，將目標(biāo)組分直接上樣至脫鹽柱。三步層析緊密銜接，前一步層析的洗脫與后一步層析的上樣同時(shí)進(jìn)行，使得純化效率顯著提高。

? ? ? ?最終產(chǎn)品經(jīng)SE-HPLC檢測(cè)，純度高達(dá)99.5%，二聚體含量?jī)H為0.5%，比Protein A - Desalting兩步層析所得產(chǎn)品的二聚體含量降低近6倍，該產(chǎn)品可直接用于氨基酸序列測(cè)定、二硫鍵測(cè)定以及糖型分析等高純度要求的檢測(cè)。

? ? ? ?Discovery高通量（HT）型系統(tǒng)，采用Protein A - CIEX- Desalting三步向?qū)K，每次上樣10 mL單抗上清液（1.0 mg/mL），每次產(chǎn)量均≥6.5 mg。單個(gè)樣品的三步純化耗時(shí)約為74 min，在24 h內(nèi)純化出多達(dá)19個(gè)樣品，而且該時(shí)間包含了層析柱的清洗環(huán)節(jié)。該系統(tǒng)持續(xù)運(yùn)行5天，純化樣品總數(shù)量高達(dá)91個(gè)。

培訓(xùn)日程安排：

2018.09.19：CaptureSMB原理及功能演示。

2018.09.20：MCSGP、N-Rich原理及功能演示。

報(bào)名及培訓(xùn)說明：

1. 培訓(xùn)費(fèi)用：8000元/人。

2. 培訓(xùn)地點(diǎn)：深圳市南山區(qū)高新中一道10號(hào)深圳高新區(qū)生物孵化器2-412

3. 報(bào)名聯(lián)系：張永闊 ?手機(jī)：13910866728 ? E-mail：zyk@prep-hplc.com? ?QQ：2355545357

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